При гнойных процессах возбудителями могут быть разные микроорганизмы: все пиогенные кокки, кроме того - бактерии сине-зеленого гноя, микобактерии и другие. Поэтому главный и точный метод - бактериологическая диагностика, то есть выделение чистой культуры и идентификация стафилококка.
Схема бактериологической диагностики гнойного пpoцеccа:
1) взятие материала - гной (стерильными тампоном или шприцем);
2) ориентировочная микроскопия гноя (мазок готовим, окраска по Граму). В поле зрения видны лейкоциты и явление фагоцитоза;
3) посев гноя на ЖСА по методу Дригальского;
4) изучение колоний:
a) изучить культуральные свойства
б) оценить чистоту колоний
5) пересев чистой культуры на МПА;
6) изучение свойств выделенной чистой культуры.
Бактериологическая диагностика сепсиса - выделение культуры из крови. Это называется выделение гемокультуры.
Особенности выделения гемокультуры:
1) из бактерий, находящихся в крови - на них действует НФЗ (фагоцитоз, пропердин и т.д.), которые разрушают бактерии;
2) для успешного выделения гемокультуры необходимо соблюдать такие условия:
· количество крови - 10-15 мл (у взрослого человека берут из вены, у ребенка - из уха или пятки);
· посев крови проводят на жидкую среду МБП + глюкоза или с сывороткой для накопления;
· посев крови проводят сразу у постели больного;
· необходимо повторить посев через несколько дней;
· используем богатые питательные среды, количество среды должно быть в 10 раз больше, чем крови, для уменьшения бактерицидных свойств крови.
Этапы выделения гемокультуры:
1) взятие материала у больного - кровь (10-15 мл);
2) посев крови на МБП с глюкозой (МБП + глюкоза для накопления);
3) пересев по Дригальскому для получения изолированной колонии:
4) окраска полученной изолированной колонии по Граму;
5) изучение свойств и идентификация по свойствам:
а) морфология;
б) тинкторильные;
в) тип гемолиза;
г) серологические идентификации - выявление АГ стафилококков;
д) для отличия от пневмококков биологическая проба на белых лабораторных мышах.
Бактериологический диагноз стафилококковой инфекции не представляет особых сложностей, если исследуют кровь и другие жидкости организма, в норме стерильные. Выделенную культуру стафилококка необходимо идентифицировать как патогенную, в отличие от обычного микроба, обитающего на коже. Для этого используют ряд тестов. Свежевыделенные культуры стафилококка характеризуются как патогенные по таким признакам как продукция желтого пигмента, гемолизина, ферментация маннита, продукция ДНК-азы и коагулазы.